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Doctoral Thesis
DOI
https://doi.org/10.11606/T.87.2008.tde-09032009-162432
Document
Author
Full name
Sonia Regina da Silva Queiroz
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2008
Supervisor
Committee
Silva, Luiziana Ferreira da (President)
Gioielli, Luiz Antonio
Marques, Marilis do Valle
Ramos, Patrícia Locosque
Vicente, Elisabete Jose
Title in Portuguese
Estudo do metabolismo de ácidos graxos em Pseudomonas putida visando a modulação da composição monomérica de elastômero biodegradável.
Keywords in Portuguese
Ácido linoléico
Elastômero biodegradável
Óleos vegetais
Polihidroxialcanoatos
Pseudomonas
Transposon
Abstract in Portuguese
Neste trabalho, foram desenvolvidas estratégias para modular a composição de elastômeros biodegradáveis da família dos polihidroxialcanoatos (PHA), produzidos por Pseudomonas, a partir de ácidos graxos ou óleos vegetais, para diversificar suas aplicações, sobretudo pela inserção de monômeros insaturados. A composição do PHA produzido variou com o tipo de ácido graxo fornecido e com sua proporção em misturas. Em genomas seqüenciados, detectaram-se dois genes fadH (codificador de 2,4-dienoilCoA hidratase) em P. aeruginosa e apenas um em outras Pseudomonas. Observou-se uma correlação entre o número de cópias de fadH no genoma e maior eficiência na oxidação de ácidos graxos insaturados. Mutantes afetados no metabolismo de ácidos graxos insaturados foram obtidos utilizando-se transposon, alguns destes mutantes apresentaram maior eficiência na incorporação de monômeros insaturados ao PHA. A clonagem e seqüenciamento de fragmentos de DNA interrompidos pelo transposon permitiram a identificação dos genes afetados nesses mutantes.
Title in English
Study of fatty acids metabolism in Pseudomonas putida aiming to modulate monomer composition of biodegradable elastomer.
Keywords in English
Biodegradable elastomer
Linoleic acid
Polyhydroxyalkanoates
Pseudômonas
Transposon
Vegetable oils
Abstract in English
Different strategies were applied to modulate the composition of biodegradable elastomeric polyhydroxyalkanoates (PHA) accumulated by Pseudomonas from fatty acids and plant oils, in order to improve the applications of this material, mainly by unsaturated monomer insertion. PHA composition varied both with fatty acid type and fatty acids ratio in mixtures supplied. Analysis of genome sequences revealed two fadH (encoding 2,4-dienoyl-CoA hydratase) copies in Pseudomonas aeruginosa and only one in other Pseudomonas species. The number of fadH copies in the genome was related to the higher oxidation of unsaturated fatty acids. Transposon-induced mutants affected on unsaturated fatty acids metabolism were obtained, some of them showing higher efficiency to incorporate unsaturated monomers do the PHA. Cloning and sequencing of transposon-disrupted DNA regions allowed to identify the genes affected in those mutants.
 
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Publishing Date
2009-03-19
 
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