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Master's Dissertation
DOI
https://doi.org/10.11606/D.11.1973.tde-20240301-153225
Document
Author
Full name
Yoko Bomura Rosato
Institute/School/College
Date of Defense
Published
Piracicaba, 1973
Supervisor
Title in Portuguese
Efeitos do etil-metano-sulfonato e acriflavina na instabilidade mitótica em Aspergillus nidulans
Keywords in Portuguese
EFEITOS FISIOLÓGICOS
FUNGOS FILAMENTOSOS
INSTABILIDADE MITÓTICA
MUTAGÊNICOS
Abstract in Portuguese
Os objetivos dopresente trabalho, utilizando-se diversas linhagens de Aspergillus nidulans, podem ser resumidos nos seguintes itens: a. Obter derivados de fenótipo melhorado através da possível eliminação de material genético extra das linhagens deterioradas, com o uso de acriflavina. b. Induzir um padrão de instabilidade em diversas linhagens, com o uso de etil-metano-sulfonato. c. Analisar geneticamente os derivados morfológicos obtidos. Quatro linhagens deterioradas (V3, V5, V8 e V9), uma linhagem duplicada (A) e uma linhagem haplóide (N) foram tratadas com os dois mutagênicos químicos, numa dose suficiente para produzir 10% de sobrevivência. Foram selecionados dez derivados morfológicos, sendo um, proveniente do tratamento com acriflavina e o restante com EMS. Os derivados morfológicos foram analisados geneticamente através das técnicas descritas por Pontecorvo e col. (1953), Roper (1952) e Morpurgo (1961). Dos resultados obtidos, as seguintes conclusões gerais podem ser mencionadas:1. A acriflavina revelou-se um mutagênico de ação bastante complexa, produzindo diversos tipos do derivados; contudo, não se mostrou eficiente na produção de derivados de fenótipo melhorado. 2. A linhagem v.3.4, resultante do tratamento com acriflavina, apresentou o determinante de deterioração situado no grupo de ligação II, à semelhança da linhagem original V3, sendo transmitida como uma unidade mendeliana simples. 3. O etil-metano-sulfonato revelou-se um mutagênico eficiente na indução de instabilidade em linhagens com duplicação cromossômica, indicando o papel positivo das duplicações na origem da instabilidade. 4. Os derivados da linhagem normal não apresentaram características de instabilidade; na linhagem N1 foi detectada a existência de uma translocação não recíproca associada à alteração morfológica e na linhagem N2 há dois grupos de ligação envolvidos com o caráter morfológico. 5. Os derivados da linhagem A, V33 e V34, apresentaram instabilidade e ambos possuem o determinante de deterioração no grupo de ligação VIII. 6. Os derivados das linhagens deterioradas apresentaram, na maioria dos casos, supressão das mutações originais e os determinantes de deterioração mostraram uma locação diferente das linhagens originais. Estes determinantes possuem comportamento de um gene simples, exceto em dois casos, V8.2 e V9.7. O primeiro envolve uma provável translocação não recíproca (III-VI) e o segundo apresenta morfologia resultante da interação de dois determinantes de deterioração situados nos grupos de ligação III e VI. 7. A supressão das características morfológicas originais pode ser explicada pela transposição dos dos determinantes genéticos (v) para outras regiões do genoma, causando o aparecimento de novas características. 8. Através da análise mitótica, foram encontrados determinantes letais em diversas linhagens. Sua origem possivelmente deve-se à presença de material genético extra no genoma. 9. Finalmente, podemos concluir dizendo que os processos de instabilidade mitótica, em Aspergillus nidulans são de natureza complexa e a análise genética clássica são nos oferece maiores esclarecimentos. Novas técnicas e novos métodos deverão ser desenvolvidos para explicar definitivamente esse fenômeno de instabilidade, que é conhecido em outros organismos e que possivelmente têm uma explicação comum.
Abstract in English
The purpose of the present research, usingvarious strains of Aspergillus nidulans, can be summarized as follows: a) the attainment of fenotipic improved derivatives, through the possible elimination with acriflavine of extra-genetic material of the deteriorate strains. b) the induction of a pattern of instability in various strains with ethyl-methane-sulfonate (EMS). e) the genetic analysis of the morphologic isolates obtained, four deteriorated strains (V3, V5, V8 and V9), one duplicated strain (A) and one haploid strain (N) were treated wi th EMS and acriflavine to produce about 10% of survival. Ten morphologically deteriorated isolates were selected: one was obtained after treatment with acriflavine and the others after treatment with EMS. It was observed that acriflavine had a very complex actuation in Aspergillus nidulans; it produced derivatives of various typis, however was not efficient to produce improved derivatives. The isolated V3.4, like the strain V3, showed the mutation for morphological alteration located in the linkage group II and it was transmited as a single mendelian unit. The EMS showed to be a efficient mutagenic agent to produce morphologic derivatives through induction of instability in duplicated strains. The isolates of deteriorated strains showed supression of the original mutations and the location of the deterioration determinants were in different location than in the original strain. The supression of the original mutations can be explained as the transposition of the deterioration determinants to another region of the genome. This determinants behave as a single gene except in two cases: V8.2 and v9.7. The first one possibly has one non-reciprocal translocation and the second has the interaction of two mutations that were located in different linkage groups. The normal strain gave complex derivatives too, wich showed association of genetic markers in different linkage groups.
 
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Publishing Date
2024-03-14
 
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