O processo de aparecimento e manutenção da atividade da enzima redutase do nitrato, “in vivo”, foi determinado em plântulas de soja, cultivadas em vermiculita, em temperatura constante e sob luz contínua. A atividade enzimática foi detectada nos cotilédones após aproximadamente 20 horas de exposição à luz contínua, e foi proporcional às concentrações de nitrato nas soluções de irrigação. O valor máximo de atividade foi obtido após 120 horas de iluminação, nos cotilédones das plântulas que receberam solução 15 mM de nitrato. As curvas referentes à acumulação de clorofila e atividade da redutase do nitrato nos cotilédones seguiram o mesmo padrão, indicando que ambos os eventos foram relacionados com o desenvolvimento de intensa atividade anabólica. A atividade da redutase do nitrato nos cotilédones foi inibida pela cicloheximida, mas não pela actinomicina D, sugerindo que a atividade enzimática depende da síntese de proteína “de novo”, mas não da síntese de RNA. A fase de aumento da atividade da enzima nas folhas primárias coincidiu com a fase de máxima atividade nos cotilédones. O mesmo fenômeno foi observado na etapa seguinte de crescimento, na qual o decréscimo da atividade da redutase do nitrato nas folhas primárias foi acompanhado do aumento da atividade na primeira folha trifoliolada. A atividade enzimática foi baixa nas folhas em início de expansão, atingiu valores máximos em folhas quase que totalmente expandidas, e declinou posteriormente com a idade. As determinações das atividades máximas da redutase do nitrato, quando efetuadas com a infiltração de nitrato nos tecidos, foram cerca de 2,3, 3,2 e 2,2 vezes maiores do que as análises sem nitrato no meio de reação, para os cotilédones, folhas primárias e primeira folha trifoliolada, respectivamente. A remoção dos 2 cotilédones, 24 horas após a emergência das plântulas, provocou decréscimos de 78 e 75% na acumulação de matéria seca e na área das folhas primárias, após 240 horas de luz contínua. Houve um atraso de 72 horas no início da expansão das folhas primárias e a primeira folha trifoliolada não se desenvolveu até o término do experimento. O desenvolvimento do caule também foi prejudicado pela remoção dos 2 cotilédones, ocorrendo decréscimos de 62 e 81% na altura e no peso da matéria seca, após 336 horas de luz contínua. A retirada de 1 cotilédone afetou em menor proporção os parâmetros considerados, ocasionando reduções de 20 e 21% na produção de matéria seca e na área das folhas primárias, após 240 horas de luz contínua. O desenvolvimento da primeira folha trifoliolada foi pouco alterado pela remoção de 1 cotilédone, e não houve defasagem na expansão das folhas primárias, quando comparadas com o controle. A altura e o peso da matéria seca do caule das plântulas com 1 cotilédone, apresentaram reduções de 14 e 29%, após 336 horas de luz contínua. As atividades máximas da redutase do nitrato, expressas em µ moles NO₂. H^-1 por folha, nas folhas primárias das plântulas com 1 e 2 cotilédones removidos, foram, respectivamente, 65 e 9% da atividade enzimática das plântulas intactas.

The pattern of “in vivo” activity of nitrate reductase was determined in soybean seedlings cultivated in a growth chamber under constant temperature and continuous light. Enzyme activity was detected in the cotyledons after approximately 20 hours of light exposure, the values being proportional to the concentration of nitrate in the irrigating solutions. In the cotyledons, the peak of activity was reached after 120 hours of illumination, under 15 mM of nitrate in the nutrient medium. Chlorophyll accumulation paralleled nitrate reductase activities in the cotyledons indicating that nitrate reduction is associated with the development of anabolic processes. Nitrate reductase activity in the cotyledons was inhibited by cycloheximide. On the other hand, actinomycin D did not affect enzyme activity suggesting that the process does depend on “de novo” protein synthesis and is not directly associated with RNA synthesis. The appearance of enzyme activity in the primary leaves coincided with the time of maximum activity in the cotyledons. By the time nitrate reductase activity started decreasing in the primary leaves, the first trifoliolate showed increasing enzyme activity. Its pattern as determined in leaves showed low values in the early stages of development, reached a peak as the leaves were almost expanded and declined thereafter. Maximum nitrate reductase activities were calculated as 2,3, 3,2 and 2,2 times higher in leaves infiltrated with nitrate than in the controls without exogenous nitrate, in the cotyledons, primary and first trifoliolate leaves, respectively. The excision of the two cotyledons, 24 hours after seedling emergence induced inhibition of dry matter accumulation and area of the primary leaves by 78 and 75%, respectively, after 240 hours of exposure to continuous light. There was a 72 hour delay in the expansion of the primary leaves. The first trifoliolate leaf did not develop throughout the experiment. The procedure caused an 81% decrease on dry weight and a 62% on stem height, 336 hours after exposure to continuous light. The removal of one cotyledon produced minor effect on plant and leaf growth, after 240 hours of exposure to continuous light. The area and dry weight of the primary leaves decreased by 21 and 20%, respectively. There was no effect on the expansion of the first trifoliolate leaf. The height and dry weight of stem diminished 14 and 29%, respectively, 336 hours after exposure to continuous light. Maximum nitrate reductase activity in the primary leaves decreased 91 and 35%, when the two and one cotyledons were excised, respectively.