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Mémoire de Maîtrise
DOI
https://doi.org/10.11606/D.11.1986.tde-20220207-234844
Document
Auteur
Nom complet
Luís Otávio Saggion Beriam
Adresse Mail
Unité de l'USP
Domain de Connaissance
Date de Soutenance
Editeur
Piracicaba, 1985
Directeur
Titre en portugais
Purificação simplificada do vírus do enrolamento da folha da batata com triton X-100
Mots-clés en portugais
BATATA
ENROLAMENTO DA FOLHA
POLEROVIRUS
PURIFICAÇÃO
Resumé en portugais
Várias metodologias foram empregadas para purificação do vírus do enrolamento da folha da batata (Potato Leaf-roll Virus PLRV). Purificações com o emprego de clorofórmio/butanol, polietilenoglicol e Triton X-100 foram efetuadas. A técnica de Triton X-100 se mostrou mais eficiente para purificação do VEFB. Tal técnica consistiu no tratamento de plantas infectadas com uma solução de Triton X-100 a 2.5% em tampão fosfato (KH2PO4) 0,5M pH 7, seguido de um ciclo de centrifugações diferenciais e gradiente de densidade em sacarose. Os precipitados resultantes foram observados ao microscópio eletrônico, revelando a presença de partículas do VEFB. O uso de Triton X-100 abre uma nova perspectiva para a purificação de fitovírus. É importante ressaltar que se trata de purificação do VEFB com o uso exclusivo de Triton X-100, sem o emprego de solventes orgânicos ou quaisquer outras substâncias comumente empregadas no processo de purificação de vírus. Antissoro para o VEFB foi obtido através da técnica de imunização via linfonódulo, apresentando um título de 1:2.
Titre en anglais
Not available
Resumé en anglais
Some purification methods were employed to purify the Potato Leafroll Virus ( PLRV). Purifications utilizing chloroform/butanol, polyethileneglicol and Triton X-100 were made. The Triton X-100 technique was efficient to purify the PLRV. The infected plants were treated with Triton X-100 at 2,5% in, buffer KH2PO4 pH 7 and submitted to a cicle of differential centrifugations and density sucrose gradient. The pellets were observed in electron microscopy and virus particles were seen. The use of Triton X-100 opens up a new perspective for the purification of fitovirus. It's important to note that this deals with the purification of PLRV with the exclusive use of Triton X-100, without the use of organic solvents or other substances normally employed in the virus purification. Antiserum to PLRV were prepared by the lymph node technique immunization, showing a titre of 1:2.
 
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Date de Publication
2022-02-07
 
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