Este trabalho teve como objetivo produzir híbrido somático de citros via fusão de protoplastos, a ser utilizado como porta-enxerto de citros. Experimentos preliminares envolveram a indução de calos embriogênicos de sete cultivares de citros a serem utilizados em experimentos de isolamento e fusão de protoplastos de citros. Os cultivares introduzidos foram: tangerinas Cravo e Ponkan (Citrus reticulata Blanco), tangor Murcote (Citrus reticulata Blanco x Citrus sinensis L. Osbeck) e laranjas Serra dágua, Natal, Valência e Pera (Citrus sinensis L. Osbeck). Foram introduzidos 50 nucelos de cada cultivar em três meios de cultura diferentes (EME, 1/2EME e EBA). Calos embriogênicos foram obtidos em todas os cultivares, exceto em laranja Pera, que produziu somente calos duros. Paralelamente ao experimento acima, foi desenvolvido um outro experimento para avaliar o efeito de diferentes fontes de carbono na indução da embriogênese somática de calos obtidos de fusão de protoplastos de laranja Caipira (Citrus sinensis L. Osbeck) + tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort. ex Tanaka), laranja Caipira (C. sinensis) + limão Rugoso da Flórida (Citrus jambhiri Lushington), laranja Pera (Citrus sinensis L. Osbeck) + tangerina Cleópatra (C. reshni) e limão Cravo(Citrus limonia L. Osbeck) + laranja Azeda (Citrus aurantium L.). O meio de cultura básico utilizado foi MT + extrato de malte (500 mg 1^-1 adicionado de sacarose (0,145M), lactose (0,145M), maltose (0,145M) ou galactose + sorbitol (0,1M + 0,1M). O açúcar que melhor estimulou a embriogênese somática foi a maltose, seguido pela lactose, galactose + sorbitol e sacarose respectivamente, exceto na combinação laranja Caipira + tangerina Cleópatra, onde a combinação galactose + sorbitol foi o segundo melhor açúcar em vez de lactose. Finalmente, foram realizados experimentos de fusão de protoplastos de laranja Caipira (C. sinensis) + limão Cravo (C. limonia) por via química, utilizando-se solução de polietilenoglicol (PEG). O cultivo dos protoplastos foi feito em meio líquido. Microcalos foram transferidos para EME semi-sólido e a embriogênese somática foi observada após 60 dias de cultivo. A regeneração de plantas se deu em meio de cultura EME + GA₃. A confirmação da hibridação somática de 4 das 39 plantas regeneradas foi feita por meio de análise da morfologia foliar, contagem do número de cromossomos e de análise molecular (RAPD).

The objective of this research was to produce citrus somatic hybrid via protoplast fusion be used as a citrus rootstock. Preliminary experiments involved calli induction of seven citrus cultivars to be used on protoplast isolation and fusion experiments. The cultivars were: Cravo and Ponkan mandarins (Citrus reticulata Blanco), Murcott tangor (Citrus reticulata Blanco x Citrus sinensis L. Osbeck), Serra dágua, Natal, Valência and Pera sweet oranges (Citrus sinensis L. Osbeck). Fifity nucelli of each cultivar were introduced onto three different culture media (EME, ½-EME and EBA). Embryogenic calli were obtained in all cultivars, except on Pera sweet orange, that produced only hard calli. Parallel with the above experiment, it was developed another experiment to evaluate different carbon sources on somatic induction of embryogenesis in calli of Caipira sweet orange (C. sinensis) + Cleopatra mandarin (Citrus reshni Hort. ex Tanaka), Caipira sweet orange (C. sinensis) + Florida Rough lemon (Citrus Jambhiri Lushington), Pera sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck) + Cleopatra mandarin (C. reshni), Rangpur lime (C. limonia) + Sour orange (Citrus aurantium L.) fusions. The basic culture media was MT + malt extract (500 mg 1^-1) with sucrose (0,I45M), lactose (0.I45M), maltose (0,I45M) or galactose (0,1M) + sorbitol (0,1M). The sugar that best stimulated somatic embryogenesis was maltose, followed by lactose, galactose + sorbitol and sucrose, except on Caipira sweet orange + Cleopatra mandarin combination, where galactose + sorbitol was the second best sugar rather than lactose. Protoplast fusion experiment of Caipira sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck) + Rangpur lime (Citrus limonia L. Osbeck) were induced by chemical method, with poliethylene glycol (PEG) solution. Protoplasts were cultured on liquid medium. Microcalli were transfered to semi-solid EME medium. Somatic embryogenesis was observed 60 days after culture. Somatic embryos were germinatated on EME + 0,5 mg 1^-1 GA₃. Four, out of 39 regenerated plants were confirmed as somatic hybrids by leaf morfological evaluation, chromossome counting and RAPD analyses.