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Mémoire de Maîtrise
DOI
https://doi.org/10.11606/D.11.1984.tde-20220208-021044
Document
Auteur
Nom complet
Maria Helena Pelegrinelli Fungaro
Adresse Mail
Unité de l'USP
Domain de Connaissance
Date de Soutenance
Editeur
Piracicaba, 1984
Directeur
Titre en portugais
Caracterização genética e dados citológicos em Aspergillus niger van Tieghem e Aspergillus awamori Nakazawa
Mots-clés en portugais
CITOGENÉTICA
FUNGOS
Resumé en portugais
O presente trabalho foi realizado com a finalidade de estudar linhagens amilolíticas de A. awamori (ATCC 22342 e ATCC 11382) e de A. niger (ATCC 22343 e ATCC 10864) considerando a caracterização genética e aspectos citológicos. Na análise citológica dos conídios foi verificado que as linhagens ATCC 22342 e ATCC 22343 produzem conídios uni, bi, tri e tetranucleados e, as linhagens ATCC 10864 e ATCC 11382, conídios uni e binucleados. Entre as linhagens ocorreu variação nas frequências dos diferentes tipos de conídios formados. Nos diplóides isolados, houve redução nas frequências de conídios com mais de um núcleo em relação às linhagens que lhe originaram. Foi observado que as linhagens ATCC 22342 e ATCC 22343 estavam em condições heterocariótica, para prolina ou arginina; também foi identificado o local do bloqueio metabólico da síntese desses aminoácidos, através do crescimento das colônias em meios diferenciais. Das linhagens originalmente heterocarióticas, foi possível isolar colônias prototróficas, auxotróficas e colônias proto/auxotróficas para prolina ou arginina. As quatro linhagens foram avaliadas quanto à produção de enzimas amilolíticas através do índice do halo de degradação do amido. As linhagens apresentaram variação de produção, destacando-se a linhagem ATCC 22342 como a mais promissora. Os diplóides se mostraram superiores em relação aos mutantes que lhes originaram, principalmente o diplóide interespecífico. Os testes em meios contendo quantidades crescentes de glicose indicaram que, possivelmente, as enzimas não são reprimidas catabolicamente pela glicose. Em relação a análise eletroforética para esterases, ficou evidenciado que as linhagens apresentam diferenças quanto ao padrão de bandas, fato também comprovado para sensibilidade ao benlate. Mutantes auxotróficos e morfológicos foram obtidos pelo método de isolamento total, e em A. awamori pelo método de enriquecimento por filtração, conseguindo-se um aumento de 41 vezes em relação ao método anterior. Pelas técnicas clássicas foram obtidos diplóides entre mutantes da mesma linhagem e de espécies diferentes. A diploidia foi confirmada pelo crescimento idêntico em meio mínimo e meio completo (MC), pela produção de setores em MC e MC + pfa e, pelo número de núcleos presentes nos conídios. Na fusão de protoplastos de A. awamori e A. niger foi possível isolar produtos de fusão porém em baixa frequência.
Titre en anglais
Genetic characterization and citologic data in Aspergillus niger van Tieghem and Aspergillus awamori Nakazawa
Resumé en anglais
The present research was carried out with the aim of studing amylolytic strains of A. awamori (ATCC 22342 and ATCC 11382) and of A. niger (ATCC 22343 and ATCC 10864) considering the genetic characterization and cytological aspects. In cytological analysis of the conidia was verified that the ATCC 22342 and ATCC 22343 strains produced conidia with one, two, three and four nuclei, and the ATCC 10864 and ATCC 11382 strains produced conidia with one and two nuclei. Among the strains occurred variation in the frequencies of different types of conidia. It was observed that the ATCC 22342 and ATCC 22343 strains were in heterokaryotic condition, for proline or arginine, and it was also identified the site of metabolic blockade of the synthesis of these aminoacids through the growth of the colonies in differentiated media. It was possible to isolate prototrophic colonies, auxotrofic colonies for proline or arginina and, proto/auxotrofic colonies from the heterokaryotic strains. The four strains were evaluated for production of amylolytic enzymes through the halo index of the starch degradation. These strains presented variation in production; the ATCC 22342 standed out as the most promissing. The diploids, mainly the interespecific one, were superior to the original mutants. The trials in media containing crescent amounts of glucose indicated that, the enzymes, possibly, are not repressed by glucose. In relation to eletrophoretic analysis for esterases, it was showed that strains presented differences for the bands standard; this event was confirmed by the sensitivity to benlate. Auxotrofic and morfologic were obtained by the method of total isolation and, by the technique of filtration enrichment in A. awamori was obtained an increase of 41 times of auxotrophic mutants. By using classic techniques were obtained diploids among mutants of the same strain, and among strains of different species. The diploidy was confirmed by identical, growth in minimal and complete media (CM), by production sectors in the conidia. In protoplasts fusion of A. awamori with A. niger, was possible to isolate fusion products, but in low frequency.
 
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Date de Publication
2022-02-08
 
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