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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.11.1997.tde-20231122-093239
Documento
Autor
Nome completo
Carmem Lúcia de Mello Sartori Cardoso da Rocha
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
Piracicaba, 1997
Orientador
Título em português
Caracterização citológica, genética e molecular de um mutante para conidiogênese em Aspergillus nidulans
Palavras-chave em português
CARACTERIZAÇÃO CITOGENÉTICA
CONÍDIOS
FUNGOS FILAMENTOSOS
MUTAÇÃO GENÉTICA
Resumo em português
Com o objetivo de estudar a conidiogênese em Aspergillus nidulans, foram obtidos por tratamento com luz ultravioleta, diversos mutantes com esporulação deficiente. Uma destas linhagens, CLB3, mostrou-se particularmente interessante por apresentar conidióforos aberrantes típicos de mutantes bristle ou medusa. As análises genéticas demonstraram tratar-se de um novo alelo do gene bristle (brlA), o mais importante gene regulador na diferenciação do conidióforo. A expressão de brlA apresenta uma coordenação temporal-espacial bastante complexa. Para isto são transcritos dois diferentes mRNAs que codificam para a mesma proteína. O primeiro, β é responsável pelo desenvolvimento do conidióforo até a fase de métula e é regulado a nível de transcrição, processamento e tradução. O segundo, α, é induzido a nível de transcrição. A morfologia do conidióforo e o mapeamento intragênico indicavam que a mutação está localizada em região anterior à estrutural, comprometendo a quantidade de produto do transcrito β. O sequenciamento mostrou uma transição C → T a -24 da origem de transcrição de β, o que deve acarretar diminuição de transcrição deste mRNA. A análise citológica da conidiogênese de CLB3 em diferentes condições de meio, osmolaridade, luz e temperatura, trouxe duas importantes contribuições para o conhecimento do papel deste gene no estágio inicial do desenvolvimento em Aspergillus nidulans: 1. Demonstrou que a deficiência de brlAβ leva à formação de conidióforos secundários, como previa PRADE & TIMBERLAKE, com deficientes construídos por tecnologia do DNA recombinante. 2. Demonstrou que todos os fatores que induzem esporulação não são capazes de suprimir a deficiência de brlAβ e, por isto, não induzem brlA, como havia sido sugerido.
Título em inglês
Cytological, genetical and molecular characterization of a conidiation mutant of Aspergillus nidulans
Resumo em inglês
To analyse the conidiogenesis in Aspergillus nidulans, some mutants oligosporous were obtained by treatment with UV. One of them, CLB3, was interesting because its aberrant conidiophores, that resembles bristle and medusa mutants. Genetic approach showed that a new alele of the bristle (brlA) gene was responsable for this phenotype. This gene is the most important regulator of conidiophore differentiation. Its expression presents a complex spacial-temporal coordination. For this purpose, there are the transcription of two differents mRNAs. Both led to the same protein. First, β is responsable by early development and is regulated by transcription, splicing and translation. The second mRNA, α, is induced only at transcription level. The conidiophore's morphology and intragenic mapping demonstrated that the mutation is upstream the structural region. The consequence is a delayed expression of the transcript β product. The sequencing showed a transition C → T at -24 of the β transcription initiation site. This damage may be led to decrease of the βmRNA transcription. Cytological analysis of the CLB3 conidiogenesis at distinct nutrition, osmolarity, light and temperature conditions led two important contributions to the knowledge about brlA at early stages of development of the A. nidulans conidiophores: 1. The demonstration that the deficiency of brlAβ led to secondary conidiophores development. This results are in concordance with PRADE & TIMBERLAKE (1993) had obtained with deficient strains constructed by molecular approach; 2. The indication that all the factors that induce conidiogenesis don't suppress the deficiency of brlAβ. This means that brlA isn’t induced by this factors as have been suggested.
 
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Data de Publicação
2023-11-24
 
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