O gene da α-amilase de B. subtilis do plasmídio pABCl (Ap^r, Km^r, Ami⁺) foi clonado no sítio de E̠c̠o̠RI do plasmídio pHV33 (Cm^r, Ap^r, Tc^r), dando origem ao vetor bifuncional (E. coli e Bacillus) denominado de pHVA4. A análise da expressão gênica foi feita medindo-se da atividade específica de α-amilase de clones recombinantes. Os resultados obtidos demonstraram que a α-amilase permanece, em sua maior parte, retida no espaço periplasmático no caso das cepas de E. coli estudadas. Uma secreção mais significativa foi obtida com o B. subtilis SB202, para o qual observou-se um aumento da atividade, enquanto que para o B. amyloliquefaciens PZ26 houve um decréscimo.

The α-amylase gene of the Bacillus subtilis plasmid pABCl (Ap^r, Km^r, Ami⁺) was cloned at the E̠c̠o̠RI site of plasmis PHV33 (Cm^r, Ap^r, Tc^r) giving rise to the shutle vector (E. coli and Bacillus) named pHVA4. The gene expression analysis was undertaken the α-amylase specific activity of the recombinant clones. The results showed that the majority of the α-amylase of the E. coli strains was retained in the periplasmatic space. A greater secretion of α-amylase from B. subtilis SB202 was observed, while Bacillus amyloliquefaciens PZ26 showed a decrease in activity.