Eixos embrionários retirados de sementes maduras de feijão (Phaseolus vulgaris) e inoculados em meio de cultura “in vitro”, contendo sais minerais, açúcar e reguladores de crescimento, originaram plantas normais. Foi determinada que a idade mínima que um embrião de feijão retirado de sementes imaturas deve ter para originar planta normal é de 13 dias. Estudos foram feitos quanto às variações de atividades de peroxidases isoperoxidases e teor de proteína solúvel em eixos embrionários inoculados diretamente em meio de cultura contendo água e ágar, e eixos embrionários retirados de sementes inoculadas neste mesmo meio. As atividades de peroxidase e isoperoxidases, aumentaram nos casos estudados, sendo esse aumento maior nos eixos embrionários inoculados diretamente no meio; o menor aumento foi encontrado nos eixos embrionários retirados de sementes, provavelmente foi devido a alteração da atividade de peroxidase quando o material sofre injúria e pela possibilidade de que o cotilédone possa secretar alguma substância inibitória, que impede o aumento da atividade de peroxidase. A quantidade de proteína solúvel tende a decrescer com o tempo, em ambos os casos, pois é utilizada para o desenvolvimento dos eixos embrionários. Os mesmos estudos foram feitos inoculando-se os eixos embrionários de sementes maduras em três diferentes meios de cultura: meio E₂ (indução de plântulas), meio E (indução de raízes) e meio E₄ (indução de calos), com material sendo coletado às 12, 24, 48 e 72 horas. Os resultados quanto à proteína solúvel e atividade de peroxidase foram os mesmos citados anteriormente. Os resultados quanto à atividade de isoperoxidase mostraram que foi maior no meio E₂ do que no meio E e do que no meio E₄; isso provavelmente seja devido a maior exigência bioquímica para a indução de formação de plântula do que para a indução de calos ou raiz. Nos cortes histológicos feitos em embriões com idades de 11 a 17 dias, foi observado que com 13 dias de idade iniciou-se a formação de cotilédones sendo nítidos neste estádio, também, os dois ápices meristemáticos (meristema caulinar e meristema radicular), o que contribuiu para a formação da plântula.

Embryo axis excised from mature seeds of bean (Phaseolus vulgaris) can be inoculated in “in vitro” conditions, using culture medium containing mineral salts, sugar and growth regulators, and can regenerate intact plants. It has been determined that 13-day-old bean embryo excised from immature seeds can regenerate normal plants. Peroxidase and isoperoxidase activities and soluble protein were measured either in embryo axis inoculated directly in agar + water (asseptic conditions) or in embryo axis excised from mature seeds and inoculated in the same kind of medium. The activities of the enzymes were higher in embryo axis inoculated directly in agar + water. Probably the lower increase of the enzymes in the embryo axis excised from seeds- was due to damage caused by the excision and also due to the fact that the cotyledons can excrete some substance that could inhibit peroxidase activity. ln both cases the soluble protein level decreased due to the fact that it is utilized for the development of the embryo axis into a seedling. Embryo axis from mature seeds were inoculated in three different culture media: medium E₂ (plant induction), medium E (root induction) and medium E₄ (callus induction). A time course experiment was set up and the material was collected at 12, 24, 48 and 72 hours. The same results for soluble protein and peroxidase activity were obtained as above. However, isoperoxidase activity was higher in the material in medium E₂ then in medium E or E₄, probably due to the greater biochemical requirements for the induction of shoots and roots then for the induction of only roots or only callus. Histological data were obtained in 11 to 17-day-old embryo, in the developing seed; in 13-day-old embryos cotyledons formation can be observed showing the two meristematic apexes (root and shoot).