A coagulação é um processo fisiológico necessário frente a situações que podem causar danos ao indivíduo. É necessário que este processo seja cuidadosamente regulado para evitar a formação exagerada de trombos. A trombose é uma das principais causas de mortalidade e morbidade ao redor do mundo. Medicamentos antitrombóticos são eficazes, todavia, o principal efeito colateral é a hemorragia, que pode ser fatal, sendo necessário o desenvolvimento de novos medicamentos com perfil de ação mais seguro. O ATB-346 é um doador de H₂S acoplado ao naproxeno que reduz rapidamente e de forma prolongada a atividade da COX, sem causar reações adversas gastrintestinais. Apesar dos processos inflamatórios e trombóticos compartilharem pontos de ativação em comum, não se sabe se o ATB-346 exerce ação protetora vascular na trombose. Para verificar esta hipótese, utilizamos camundongos machos C57BL/6 e vasos piais cerebrais, em que trombos foram induzidos in vivo e in situ pela ação de luz e do corante fluoresceína (FITC) e observados por microscopia intravital. Como controles, os animais foram tratados com naproxeno, tiobenzamida (TBZ) - porção doadora de H₂S do ATB-346, em doses equimolares, veículo (solução de dimetilsulfóxido DMSO em carboximetilcelulose CMC) ou salina 0,9%. Foram medidas espécies reativas de oxigênio (EROs) na região do trombo, in vivo, as expressões de fibrinogênio hepático por reação de polimerase em cadeia (PCR) em tempo real, os tempos de protrombina (TP), tromboplastina parcial ativada (TTPa) e a concentração circulante de fibrinogênio por kits comerciais, contagem plaquetária, as concentrações de malondialdeído (MDA), interleucina 1b (IL-1b), tromboxano B2 (TXB2) no cérebro por ensaio imunosorbente ligado à enzima (ELISA), concentração plasmática de H₂S por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e análise macroscópica gástrica. Observamos que animais tratados com ATB-346 mostraram aumento nos tempos de início de formação de trombo e de oclusão total do vaso após indução do trombo, diminuição na expressão de fibrinogênio hepático e redução na concentração plasmática de H₂S, por efeito sinérgico do naproxeno e TBZ. Assim, concluímos que o ATB-346 é efetivo para retardar a formação de trombos no cérebro de camundongos por atuar reduzindo as concentrações plasmáticas de H₂S e a expressão hepática de fibrinogênio.

Coagulation is a necessary physiological process in situations that can put the individual in danger. This process needs to be carefully balanced to avoid disseminated thrombus formation. Thrombosis is one of the main causes of mortality and morbidity worldwide. Antithrombotic drugs are effective, however, the main side effect is hemorrhage, which can be fatal. Therefore, it is necessary to discover safer antithrombotic drugs. ATB-346 is an H₂S donor coupled to naproxen that longer and rapidly reduces the activity of COX, with no concomitant gastrointestinal side effects. However, despite of inflammation and coagulation share common activation steps, it is not known whether these H₂S donor exert any vascular protective action on thrombus formation. To verify this hypothesis, we used male C57BL/6 mice and pial cerebral vessels, in which thrombi were induced in vivo and in situ by the action of light and fluorescein dye (FITC) and observed by intravital microscopy. As controls, equimolar naproxen or thiobenzamide the H₂S donor part of ATB-346 alone, as well as vehicle (dimethyl sulfoxide, DMSO in carboxymethylcellulose, CMC), or 0.9 % saline. Reactive oxygen species (ROS) were measured in the region of the thrombus, in vivo, hepatic fibrinogen expressions by real-time polymerase chain reaction (PCR), prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT) and fibrinogen circulating concentration, all measured using commercial kits, platelet count, malondialdehyde (MDA), interleukin 1b (IL-1b), thromboxane B2 (TXB2) concentrations in the brain by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), plasma H₂S concentration by high-performance liquid chromatography (HPLC), and gastric macroscopic analysis. We observed that animals treated with ATB-346 showed an increase in the time to initial thrombus formation and total vessel occlusion after thrombus induction, decrease hepatic fibrinogen expression and a reduction in plasma H₂S concentration, due to the synergistic effect of naproxen and TBZ. Thus, we conclude that ATB-346 is effective in delaying the formation of thrombus in the brain of mice by reducing plasma H₂S concentration and hepatic fibrinogen expression.