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Master's Dissertation
DOI
10.11606/D.46.2016.tde-16022016-180852
Document
Author
Full name
Soraia Ferini Namora
E-mail
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2004
Supervisor
Committee
Leite, Luciana Cezar de Cerqueira (President)
Dias Neto, Emmanuel
Marques, Marilis do Valle
Title in Portuguese
Análise do locus de β-lactamase de bcg como sítio de Inserção de antígenos heterólgos
Keywords in Portuguese
Antibióticos (Eficiência)
Antígenos de bactérias
Biologia molecular (Aplicações)
Micobacteriose (Resistência)
Abstract in Portuguese
A tuberculose, doença causada pelo patógeno M. tuberculosis, é um dos grandes problemas da saúde pública mundial. A única vacina disponível contra tuberculose é o M bovis BCG. As micobactérias são naturalmente resistentes a uma grande variedade de antibióticos, entre os quais os β-lactâmicos, que são as penicilinas e cefalosporinas. O mecanismo mais comum de resistência aos antibióticos é a produção de β-lactamase, que cliva o anel β-lactâmico. Nas micobactérias, o mecanismo parece ser um pouco mais complexo, já que a parede celular dessas bactérias contém os ácidos micólicos, que conferem característica altamente hidrofóbica à parede. O objetivo deste projeto foi a disrupção do gene da β-lactamase de BCG por recombinação homóloga, para investigação do papel desta na resistência de micobactérias a antibióticos β-lactâmicos, e da possibilidade de utilizá-la como sítio de inserção de cassete de expressão de antígenos heterólogos. Para tal, foi donado o gene β-lactamase de BCG, que posteriormente, foi truncado e inserido em um vetor suicida, contendo gene de resistência a higromicina e o gene sacB para contra-seleção. BCG então foi transformado com este vetor. Verificou-se que após a primeira etapa de recombinação, as bactérias cresciam pouco, sendo, provavelmente, a β-lactamase, um gene essencial. Infelizmente, não foram obtidos mutantes secundários. Verificou-se também que é possível a expressão de LT em rBCG, utilizando-se vetores extracromossomais, o que abre a possibilidade de expressão no genoma micobacteriano.
Title in English
Analysis ofthe -lactamase locus bcg as site heterolgs antigens insertion
Keywords in English
Antibiotics (Efficiency)
Antigens of bacteria
Molecular biology (Applications)
Mycobacterium (Resistance)
Abstract in English
Abstract not available.
 
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Publishing Date
2016-02-16
 
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