Doença de Parkinson (DP) é a segunda patologia neurodegenerativa mais frequente na população mundial. É uma doença crônica, progressiva e complexa em sua expressão clínica. A DP está associada a deficiência de dopamina nas vias nigroestriatais, afetando diretamente o sistema motor. A terapia com o pró-fármaco dopaminérgico, levodopa, associado à carbidopa tem se configurado como o tratamento mais eficaz na minimização dos sintomas motores, melhorando a qualidade de vida dos pacientes, principalmente no estágio inicial da doença. No entanto, com a progressão da DP e mediante a complicações provocadas pelo tratamento prologando com esses fármacos, ajustes das doses são necessárias. Neste contexto, métodos cromatográficos têm sido desenvolvidos e padronizados para a determinação dos níveis plasmáticos de carbidopa, levodopa e seus metabólitos. Estas determinações auxiliam na individualização do regime de dosagem dos fármacos prescritos e minimização dos efeitos adversos. Neste projeto, um método empregando as técnicas de microextração dispersiva em ponteira com a fase bifuncional oasis MCX e a cromatografia de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS/MS) foi padronizado e validado para determinação de levodopa, carbidopa e 3-o-metildopa em amostras de plasma humano. O procedimento DPX com a fase MCX demostrou ser adequado para pré-concentrar os analitos e excluir interferentes da amostra biológica. A coluna Gold HILIC (2,1 mm x 100 mm x 1,9 µm) utilizada, resultou em satisfatória separação dos analitos e em rápido tempo de análise (5 min). O método desenvolvido apresentou linearidade adequada nos intervalos de 50-600 ng.mL-1 para a levodopa, 20-600 ng.mL-1 para a carbidopa e 20-500 ng.mL-1 para a 3-o-metildopa, com coeficientes de correlação (r) e de determinação (r2) maiores que 0,99. Os valores de precisão (CV) e os valores de exatidão (EPR) variaram, respectivamente, de 0,4 a 16,8% e de -0,3 a 16,2%. O paralelismo entre as retas obtidas com as curvas analíticas construídas com amostras de plasma e de água enriquecidas com os analitos foi demostrado com teste t, a nível de significância de 5%, indicando efeito matriz pouco significativo. O método proposto foi aplicado com sucesso na determinação de levodopa, carbidopa e 3-o-metildopa em amostras de plasma.

Parkinson's Disease (PD) is the second most common neurodegenerative disorder in the world population. It is a chronic, progressive, and complex disease in its clinical expression. PD is associated with dopamine deficiency in the nigrostriatal pathways, directly affecting the motor system. Therapy with the dopaminergic drug levodopa associated with carbidopa has been the most effective treatment in minimizing motor symptoms, improving the quality of life of patients, especially in the initial stage of the disease. However, with PD progression and the complications caused by prolonged treatment with these drugs, dose adjustments are necessary. In this context, chromatographic methods have been developed to determine the plasma levels of carbidopa, levodopa, and their metabolites. These determinations support individualization of the drug dosing regimen and help to minimize adverse effects. In this project, a method comprising dispersive microextraction in tip with the mixed-mode MCX oasis phase and ultra-high performance chromatography coupled to mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) was standardized and validated for determination of levodopa, carbidopa, and 3-o-methyldopa in human plasma samples. During the sample preparation step, the DPX procedure with the MCX phase proved to pre-concentrate analytes and to exclude interferences adequately. The Gold HILIC column (2.1 mm x 100 mm x 1.9 µm) exhibited adequate separation efficiency and fast analysis time (5 min). The method showed linear ranges of 50600 ng.mL-1, 20600 ng.mL-1, and 20500 ng.mL-1 for levodopa, carbidopa, and 3-o -methyldopa, respectively, with correlation coefficients greater than 0.99. The method was precise and accurate with CV values ranging from 0.4 to 16.8% and RSD values ranging from -0.3% to 16.2%. The t test, at a significance level of 5%, demonstrated the parallelism between the lines obtained by constructing analytical curves with plasma and water samples enriched with the analytes, indicating a negligible matrix effect. The proposed method was successfully applied to determine levodopa, carbidopa, and 3-o-methyldopa in plasma.